2گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه رازی، کرمانشاه
چکیده
گال طوقه و ریشه ناشی از باکتری Rhizobium vitis از مهمترین بیماری‌های انگور در سراسر جهان به‌شمار می‌آید. از آنجاییکه تاکنون کنترل شیمیایی موثری برای این بیماری ارائه نشده است، کنترل آن با برخی باکتری‌های آنتاگونیست مورد توجه قرار گرفته است. این پژوهش با هدف شناسایی باکتری‌های خاکزی باغ‌های انگور استان قزوین و بررسی اثر آنتاگونیستی آنها بر Rh. vitis انجام شد. از نمونه‌های جمع‌آوری شده از خاک و ریشه و طوقه انگور در 22 منطقه استان، 210 جدایه به‌دست آمد و پس از گروه بندی، 73 جدایه برای بررسی بیشتر انتخاب شدند. شناسایی جدایه‌ها با آزمون‌های فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی انجام شد. به‌علاوه، از آغازگرهای Bsub5F/Bsub3R برای تایید شناسایی جدایه‌های مشکوک به Bacillus subtilis استفاده شد. توانایی جدایه‌ها در تولید آنتی‌بیوتیک، سیدروفور، سیانید هیدروژن و آنزیم پروتئاز بررسی گردید و جهت شناسایی جدایه‌های سودوموناس‌فلئورسنت دارای ژن‌های PhID و hcnABC، به‌ترتیب از آغازگرهایPhI2a /PhI2b وPM2 /PM7-26R استفاده شد. اثر آنتاگونیستی پنج جدایه، انتخاب شده از بین باکتری‌های مختلف شناسایی شده، بر باکتری عامل بیماری روی قطعات شلغم و هویج بررسی گردید. بر اساس نتایج، جدایه‌های آنتاگونیست به بیوارهای I، III و IV از Pseudomonasfluorescens و B. subtilis تعلق داشتند. همه جدایه‌های مذکور با تولید آنتی‌بیوتیک از رشدRh. vitis جلوگیری کردند. به‌علاوه، بیوارهای I، III و IV از P.fluorescens قادر به تولید پروتئاز و سیانید هیدروژن بودند اما در تولید سیدروفور، نتایج متفاوتی را نشان دادند. آغازگرهای اختصاصی وجود ژن‌های PhID و hcnABC را در بعضی از جدایه‌های بیووارهای I و IV از P.fluorescens به اثبات رساندند. دو جدایه از بیووار I و یک جدایه از بیووار IV از P.fluorescens و نیز دو جدایه از B. subtilis به‌طور کامل از تشکیل گالتوسطRh. vitis روی قطعات شلغم و هویج جلوگیری کردند.
Identification of soil inhabiting bacteria in Qazvin province vineyards and investigation of their inhibitory effect on Rhizobium vitis, the causal agent of grape root and crown gall
چکیده [English]
Root and crown gall caused by Rhizobium vitis, is one of the most important diseases of grapevine worldwide. Although there is no efficient chemical control for the disease, various antagonistic bacteria have been studied for its biocontrol. This study was conducted to identify soil inhabiting bacteria in Qazvin province vineyards and to investigate their inhibitory effect on the pathogen. Samples were collected from soil, as well as grape root and crown in 22 areas over the province. Two hundred ten bacterial isolates, obtained from the samples, were grouped and 73 isolates were selected for further study. Identification of the isolates was performed using physiological and biochemical tests. Also, primers Bsub5F and Bsub3R were used to confirm identification of isolates resembling Bacillus subtilis. Ability of the isolates for antibiotic, siderophore, hydrogen cyanide and protease production was studied. Primer pairs PhI2a/PhI2b and PM2/PM7-26R were used to detect PhID and hcnABC genes respectively in fluorescent psuedomonds. Antagonistic effect of five strains, selected from the identified bacteria, on the pathogen was studied on carrot and turnip slices. Based on the results, antagonistic bacteria belonged to Pseudomonasfluorescens biovar I, III and IV, as well as B. subtilis. All strains produced antibiotic and inhibited growth of the pathogen. Also, strains identified as P. fluorescens biovar I، III and IV produced hydrogen cyanide and protease; however, it differed in siderophore production. PhID and hcnABC genes were detected in strains belonging to P.fluorescens biovar I and IV. Two strains belonging to P.fluorescens biovar I, one P.fluorescens biovar IV strain and two B. subtilis strains inhibited gal formation by Rh. vitis on carrot and turnip slices.
ابتدای صفحه